日本做爰高潮又黄又爽,亚洲精品97久久中文字幕无码,婷婷丁香五月,男澡堂洗澡勃起好大一根

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術(shù)與支持 > 細(xì)胞遷移以及侵襲實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞遷移以及侵襲實(shí)驗(yàn)
點(diǎn)擊次數(shù):3432 更新時間:2015-07-31

  遷移實(shí)驗(yàn)(cell migration assay)

 實(shí)驗(yàn)材料
(1)ThinCert插入式細(xì)胞培養(yǎng)器: 24-well, 8.0-μm pore membranes (Greiner662638)

(2)細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑:無血清培養(yǎng)基,10%血清培養(yǎng)基,PBS,0.02%EDTA

(3)固定液:甲醇

(4)染色液:Giemsa染液

(5)封片劑:中性樹膠

(6)其他:小鑷子,棉棒,載玻片,蓋玻片

 操作步驟

(1)所有細(xì)胞培養(yǎng)試劑和ThinCert放在37℃溫育;

(2)待測細(xì)胞培養(yǎng)至對數(shù)生長期,消化細(xì)胞,用PBS和無血清培養(yǎng)基先后洗滌一次,

 用無血清培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整濃度  為2×105 /ml;

(3)在下室(即24孔板底部)加入600-800μl 含10%血清的培養(yǎng)基,上 室加入100-

 150μl細(xì)胞懸液,繼續(xù)在孵箱培養(yǎng)24小時;

(4)用鑷子小心取出ThinCert,吸干上室液體,移到預(yù)先加入約800μl甲醇的孔中,室溫固定30分鐘;

(5)取出ThinCert,吸干上室固定液,移到預(yù)先加入約800μl Giemsa染液 的孔中,室溫染色15-30分鐘;

(6)輕輕用清水沖洗浸泡數(shù)次,取出ThinCert,吸去上室液體,用濕棉棒小 心擦去上室底部膜表面上的細(xì)胞;

(7)用小鑷子小心揭下膜,底面朝上晾干,移至載玻片上用中性樹膠封片;

 (8)顯微鏡下取9個隨機(jī)視野計(jì)數(shù),統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

  注意事項(xiàng)

(1)根據(jù)待測細(xì)胞體積大小選擇合適孔徑的ThinCert。常用的為8.0-μm孔徑(如

  AGS細(xì)胞),如果細(xì)胞體積較大可以考慮用10-μm孔徑;

(2)根據(jù)待測細(xì)胞的遷移能力強(qiáng)弱調(diào)整細(xì)胞數(shù)和遷移時間。常規(guī)24-well  ThinCert接種細(xì)胞數(shù)約

 為2≈5×104/well, 遷移時 間 12≈36小時;

(3)由于Greiner公司的24-Transwell內(nèi)含24個獨(dú)立的ThinCert,為了避免操作污染,

 每次實(shí)驗(yàn)可預(yù)先另準(zhǔn)備一塊24孔普通培養(yǎng)板(Greiner);

(4)如果細(xì)胞遷移能力較弱,下室液體可用3T3細(xì)胞無血清培養(yǎng)24小時獲得 的上清加50μg/ml FN(Fibronectin),

 具體可查  閱相關(guān)文獻(xiàn);

(5)細(xì)胞懸液加入膜中央,盡量保證液面水平;

(6)固定染色擦洗時動作小心,避免擦去膜底面的細(xì)胞。但一定要充分擦凈膜 表面上未遷移的細(xì)胞,

 以免影響讀數(shù)。尤其是  膜周邊上可用細(xì)牙簽或小鑷子纏上濕棉花擦洗,但要小心避免將膜戳破;

(7)Chamber和膜上都無法標(biāo)記,操作時應(yīng)小心避免混淆實(shí)驗(yàn)組和對照組;

(8)充分晾干,避免殘留水分導(dǎo)致鏡下聚焦不一致。



扒开少年白嫩的屁股动态图| 日韩乱码人妻无码中文字幕久久 | 一女被二男吃奶a片免费观看| 欧美大屁股眼子xxxxx视频| 亚洲乱码国产乱码精品精| 绝伦の上司に一晚人妻| 亚洲成a人片77777kkkk| 偷窥 性别 瘾 xxxxx| 精品国产乱码一区二区三区app| 亚亚洲精品黑人巨大在线播放| 姐姐的朋友电影| 一个添下面两个吃奶把腿扒开| 欧美人禽性动交异族另类| 欧美粗大猛烈18p| 欧洲熟妇色xxxx欧美老妇多毛 | 老女人重囗味456| 嗯h客厅h禁欲教授| 欧美成人在线视频| 成人网站在线观看| 亚洲精品中文字幕| 2020国产情侣在线视频播放| 寡妇大j8又粗又大| 丝袜 中出 制服 人妻 美腿| 自w到高c的25种方法带图| 乳妓h军妓调教hh文| 夜夜爽妓女8888视频免费观看| 黑人大战日本娇小xxoo| 51精产国品一二三产区区别| 日韩在线视频| 啦啦啦资源视频在线观看8| 日本少妇bbw丰满做爰图片| 初尝禁果稚嫩宫交h| 少妇人妻互换不带套| 乖宝撞的你舒不舒服h| 狮王的巨大挺进体内h| 天干天干天干天干日天干| 国产精品久久毛片| 国产精品素颜系列| 无码人妻一区二区三区精品视频 | 玖玖热麻豆国产精品视频| 天堂在\/线中文官网|